在液相色譜柱的使用中，我們會發(fā)現(xiàn)很多實(shí)驗(yàn)室會面臨色譜柱頻繁損壞的問題。
首先，需要來了解一下色譜柱的損壞來源于哪些方面：
泵頭密封圈的磨損
進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)子密封圈的磨損
析出的緩沖鹽
樣品中的復(fù)雜易吸附基質(zhì)
其實(shí)，在工作過程中大多數(shù)的顆粒物堵塞導(dǎo)致的色譜柱背壓升高問題是體現(xiàn)在柱頭堵塞。
而樣品的易吸附機(jī)制也可能會和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導(dǎo)致色譜柱背壓升高。
但是這種情況在較低的PH系統(tǒng)中會有所改善，因?yàn)檩^低的PH系統(tǒng)會降低硅膠表面的硅醇基發(fā)生解離。
預(yù)防措施
1在液相系統(tǒng)中加入在線過濾器
在線過濾器的內(nèi)部顆粒空隙一般是0.5微米，對于UHPLC會選擇0.2微米空隙的在線過濾器。這個空隙尺寸和柱頭的過濾篩板尺寸接近或者略小。
所以，在線過濾器能夠有效的阻隔來自樣品、泵頭密封墊、自動進(jìn)樣器的轉(zhuǎn)子密封墊的顆粒物，以防止柱頭過濾篩板的堵塞。
注意：但是對于非常低死體積的液相系統(tǒng)，在線過濾器的加入可能會導(dǎo)致系統(tǒng)死體積增大峰展寬變嚴(yán)重的問題。而對于大多數(shù)的液相系統(tǒng)而言，色譜圖不會有太大變化。
2在柱子前端使用保護(hù)柱
保護(hù)柱有很多種，通用型、一體式、卡套式，但是它其實(shí)是一個和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。
因?yàn)樗哂泻头治鲋嗤膬?nèi)部填料，所以保護(hù)柱不僅可以阻隔顆粒物，還可以阻隔易吸附的樣品基質(zhì)組分。
注意：由于保護(hù)柱中可能有大量的強(qiáng)保留組分，在用強(qiáng)溶劑清洗系統(tǒng)時請取下保護(hù)柱，以防止這些強(qiáng)保留組分被洗脫進(jìn)分析柱。保護(hù)柱如果出現(xiàn)吸附飽和也可能會對分離效果有影響
3對樣品進(jìn)行凈化處理
有一些液相的分析方法沒有明確標(biāo)注樣品的凈化，但我希望大家在做分析時都能夠考慮樣品的凈化，常用的方案是對樣品進(jìn)行過濾。
在實(shí)際工作中，色譜柱的儲存也會影響柱子的使用壽命。那么對于色譜柱的儲存，也有以下建議：
短期儲存時
應(yīng)該保存在接近常用的流動相條件下。并且，一定要移除系統(tǒng)中的緩沖鹽、酸等。
長期儲存時
將色譜柱按照說明書的要求保存在對應(yīng)的溶劑中，并且將色譜柱從系統(tǒng)中取下兩頭用堵頭堵死。
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